yh533388银河

新闻中心

    qPCR基线和阈值的看法及设置要领

    640.png

    1671175881475321.jpg

    640 (1).png

    图2.扩增曲线显示了设置不当的基线 (A) 和设置正确的基线 (B)。



    阈值的设置

    Applied Biosystems?提供两种阈值设置要领:自动和手动。自动设置中,软件将自动选择阈值,此阈值更适合平台更高的曲线 (图3中的蓝色曲线)。然而这将导致此数据组中的红色曲线的 Ct 值泛起偏差,因为其至佳阈值比此值更低。通常情况下,默认设置通常已十分适当,但也可将阈值手动拖至指数期中间,以获得更高的准确度。因此,需对每个数据组进行独立研究,这样才华凭据具体情形选择至佳阈值。


    1671175937636311.jpg

    图3.对数曲线屏幕截图显示了两组曲线,它们的平台高度和指数期差别。扩增曲线中确定 Ct 的至准确部分位于对数曲线指数期的中间。至佳阈值设置有时因各组数据的差别而异。


    转载: 江西yh533388银河 民众号 链接:https://mp.weixin.qq.com/s/pI_PVK4yUZcb7FH7ZoKMZA



    微信民众号

    come-here
    网站地图